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ELISA实验结果常见问题解决方案：样本值不佳

点击次数：1262 次    更新时间：2017-02-13

ELISA实验结果常见问题解决方案：样本值不佳


ELISA实验结果常见问题：样本值不佳，结果重复性不好


ELISA实验标准曲线吸光值、梯度挺好，但是样本值不佳，样本浓度太低或太高，总结原因如下：

 
序号   可能原因   解决方法
1
  标曲选择不合适   选择最合适的标曲拟合。
2
  样本含量很低，低于灵敏度
  无法被检测到 		  尝试浓缩样本或使用高敏ELISA试剂盒检测。
3
  样本含量很高，超过标曲   建议进行预实验摸索稀释倍数，确保样本OD值落在标曲范围内。


ELISA 实验结果重复性不好，可能的原因：

序号   可能原因   解决方法
1   微量加样不准确   保证微量加样的准确性和均一性，定期校准移液器。
2   样品不均一   加样前充分混匀样品，取样确保移液位置一致。
3   加样量不一致   样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。
4   孔与孔之间的交叉污染   孵育后取下盖子小心操作，避免孔与孔的污染；封板膜不能重复使用。
5
  边缘效应
  （外周孔显色较中心孔深）
  孵育时尽量100 rpm旋转混匀。
6   包被板表面遭到破坏   洗板加样时尽量小心，避免破坏板的包被表面。
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