现货促销:
组分:
100 mL of Human Methylcellulose Complete Media
15 mL of Cell Resuspension Solution
产品优势:
不需要添加血清或细胞因子
优质高品质重组蛋白优化而来,用于人造血干细胞分化和计数
极佳的透光率有利于克隆鉴定
高批次间一致性,减少实验误差
CFC Protocol
用人甲基纤维素完全培养基(Catalog # HSC003)进行人集落细胞形成分析实验:
1. 用Ficoll-Paque梯度离心准备单个核细胞
2. 用HBSS洗细胞两次并收集细胞,400 x g离心10min
3. 10mL IMDM重悬单个核细胞,然后细胞计数
4. 室温解冻人甲基纤维素完全培养基
5. 转移适当体积的细胞到一个新的15ml离心管,300 x g离心10min
6. 去除上清,用Cell Resuspension Solution重悬细胞,制成10 X细胞储存液
7. 取适当体积的10 X细胞储存液,加入需要的细胞培养添加物/细胞因子和人甲基纤维素完全培养基,培养基最终浓度是1.27%
8. 剧烈涡旋振荡样本,等待约20分钟让气泡漏出
9. 用3ml注射器和一个16号针头将1.1ml 该细胞混合物加入到35mm培养皿(non-tissue culture treated),缓慢摇动使培养基均匀覆盖
10. 将2个接种细胞的35mm培养皿和一个有3-4ml无菌水的无盖35mm放置到一个10cm皿中(如下图所示)
11. 37 °C,5% CO2培养14-16天
12. 倒置显微镜观察集落形成,scoring grid计数。
咨询电话
027-85604082027-85580331