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完全培养基推荐:人甲基纤维素

点击次数:2367 次    更新时间:2017-03-08

完全培养基推荐:人甲基纤维素


R&D完全培养基推荐:人甲基纤维素


现货促销:

存货编码 存货名称 规格 菌落选择 包含血清 包含细胞因子

59-HSC003
Human Methylcellulose Complete
Media (100 ML)
100 ML BFU-E
CFU-E
CFU-G
CFU-GEMM
CFU-GM
CFU-M
Epo
GM-CSF
IL-3
SCF


组分:

100 mL of Human Methylcellulose Complete Media

15 mL of Cell Resuspension Solution

产品优势:

 不需要添加血清或细胞因子

 优质高品质重组蛋白优化而来,用于人造血干细胞分化和计数

 极佳的透光率有利于克隆鉴定

 高批次间一致性,减少实验误差

人造血细胞集落形成--基于甲基纤维素的集落形成细胞 (CFC) 分析

 

CFC Protocol

用人甲基纤维素完全培养基(Catalog # HSC003)进行人集落细胞形成分析实验:

1. 用Ficoll-Paque梯度离心准备单个核细胞

2. 用HBSS洗细胞两次并收集细胞,400 x g离心10min

3. 10mL IMDM重悬单个核细胞,然后细胞计数

4. 室温解冻人甲基纤维素完全培养基

5. 转移适当体积的细胞到一个新的15ml离心管,300 x g离心10min

6. 去除上清,用Cell Resuspension Solution重悬细胞,制成10 X细胞储存液
 

参考细胞数
样本来源                                
Final Cell Number1
Stock Cell Number (10x final)
Enriched CD34Cells
5.0 x 10- 2.0 x 103
5.0 x 10- 2.0 x 104
Cord Blood
5.0 x 10- 2.5 x 104
5.0 x 10- 2.5 x 105
Peripheral Blood
1.0 x 10- 2.0 x 105
1.0 x 10- 2.0 x 106
Mobilized Peripheral Blood
1.0 x 10- 5.0 x 104
1.0 x 10- 5.0 x 105
Bone Marrow (low-density)
1.0 x 10- 5.0 x 104
1.0 x 10- 5.0 x 105

7. 取适当体积的10 X细胞储存液,加入需要的细胞培养添加物/细胞因子和人甲基纤维素完全培养基,培养基最终浓度是1.27%

8. 剧烈涡旋振荡样本,等待约20分钟让气泡漏出

9. 用3ml注射器和一个16号针头将1.1ml 该细胞混合物加入到35mm培养皿(non-tissue culture treated),缓慢摇动使培养基均匀覆盖

10. 将2个接种细胞的35mm培养皿和一个有3-4ml无菌水的无盖35mm放置到一个10cm皿中(如下图所示)


 

11. 37 °C,5% CO2培养14-16天

12. 倒置显微镜观察集落形成,scoring grid计数。

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